### 定义

在生物医疗领域，凝胶电泳系统是一种重要的分离技术，其中不同部位的pH、离子强度、缓冲液成分或凝胶孔隙大小各不相同的凝胶电泳被称为不连续电泳。其主要目的是为了提高样品的分离范围和分辨率。

不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳利用两种以上的缓冲液成分、不同的pH值以及凝胶孔径，在电泳过程中形成的电位梯度也呈现不均匀状态。这种设置可以产生浓缩效应、电荷效应和分子筛效应，有效提高生物样品的分离效率。

### 不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理

1. **浓缩效应**：在电泳开始时，样品通过浓缩胶被浓缩成高浓度的薄层，通常可以达到几百倍的浓缩。在电场作用下，解离度最大且有效迁移率最高的Cl^-离子被称为快离子，而解离度次之的蛋白质则在其后，最后是解离度最低的甘氨酸离子（pI=6.0），其泳动速度最慢。快离子的迅速移动形成低浓度区域，从而产生高电势梯度，使得蛋白质和慢离子得以加速移动。在高与低电势梯度之间，样品中蛋白质的有效迁移率恰好介于快、慢离子之间，这使得其在高电势梯度区域汇聚并逐渐被浓缩，当达到小孔径的分离胶时，已形成一薄层。

2. **电荷效应**：当各种离子进入pH值为8.9的小孔径分离胶后，甘氨酸离子的电泳迁移率将迅速超过蛋白质，从而高电势梯度消失。在均一电势梯度和pH的分离胶中，由于不同蛋白质的等电点和带电荷量不同，导致在电场中受到的引力也不同。经过一定时间的电泳，各种蛋白质将以特定顺序排列成带状结构。

3. **分子筛效应**：由于分离胶的孔径较小，不同分子量或分子形状的蛋白质在通过分离胶时受到的阻滞程度不同，因此迁移率也不同。这种分子筛效应指的是样品通过一定孔径的凝胶时，小分子走在前面，大分子走在后面，使得各种蛋白质能根据其分子大小的不同，形成相应的区带。

在生物医疗的研究中，不断优化的凝胶电泳技术，如尊龙凯时所倡导的先进电泳设备，让实验分析变得更加高效和准确，为生物样品的分离与鉴定提供了良好的支持。